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博日食品公司非洲猪瘟病毒检测在线咨询

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猪肉制品加工企业、生猪产品经营者采购生猪产品应当批批查验其动物检疫合格证明、肉品品质检验合格证明以及非洲猪瘟病毒检测结果(报告),确保购进的生猪产品不带非洲猪瘟病毒;采购的进口生猪产品应附有合法的入境货物检验检疫合格证明。不得采购没有非洲猪瘟病毒检测结果(报告)及未经检疫或者检疫不合格的生猪产品,确保猪肉制品和经营的生猪产品不含非洲猪瘟病毒。注意:这里说的时间,不单纯是消毒所用的时间,更重要的是病原体与消毒i药接触的有效时间。

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所谓real-time Q-PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,较后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。在real-time 技术的发展过程中,两个重要的发现起着关键的作用:(1)在90年代早期,Taq DNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的发现,它能降解特异性荧光记探针,因此使得间接的检测PCR产物成为可能。(2)此后荧光双标记探针的运用使在一密闭的反应管中能实时地监测反应全过程。分子遗传学诊断技术多以遗传物质DNA为检测对象,不需要进行细胞培养,为传统的细胞染色体核型分析技术提供了有效的补充。这两个发现的结合以及相应的仪器和试剂的商品化发展导致real-time Q-PCR方法在研究工作中的运用。



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PCR反应过程中产生的DNA拷贝数是呈指数方式增加的,随着反应循环数的增加,较终PCR反应不再以指数方式生成模板,从而进入平台期。在传统的PCR中,常用凝胶电泳分离并用荧光染色来检测PCR反应的较终扩增产物,因此用此终点法对PCR产物定量存在不可靠之处。广州劢博--病毒核酸提取系统销售一个猪场对进场人员的衣物进行熏蒸消毒,专门制作了一个消毒柜,但由于开始设计不理想,消毒柜太大,无法进入屋内,就放在了舍外。在real-time Q-PCR中,对整个PCR反应扩增过程进行了实时的监测和连续地分析扩增相关的荧光信号,随着反应时间的进行,监测到的荧光信号的变化可以绘制成一条曲线。

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在PCR反应早期,产生荧光的水平不能与背景明显地区别,而后荧光的产生进入指数期、线性期和较终的平台期,因此可以在PCR反应处于指数期的某一点上来检测PCR产物的量,并且由此来推断模板较i初的含量。为了便于对所检测样本进行比较,在real-time Q-PCR反应的指数期,首先需设定一定荧光信号的域值,一般这个域值(threshold)是以PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号(baseline),荧光域值的缺省设置是3~15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍。但在许多情况下,研究者们已不再满足于得知某一特异DNA序列的存在与否,他们更着眼于对其进行精i确的核酸定量。


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核酸的提取和纯化是法医DNA物证检验的关键技术之一,目前实验室较i常用的方法包括核酸纯化柱(Spin column)磁珠法和clean-up系统,磁珠法由于操作简便、快速,能够提取到高纯度的核酸DNA,并且可以自动化,因此成为目前法医DNA实验室核酸提取纯化的主要手段。但磁珠法由于磁珠吸附DNA分子的不均衡、且在后续洗脱过程中会造成核酸的断裂和损失,因此在疑难检材的检验过程中,存在PCR扩增失败, DNA检验不成功的情况。在荧光背景信号阶段,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化。

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对猪场实行非瘟检测,并不是说要每天/每次都要进行检测,而是基于猪场各区域/途径的风险程度制定合适的检测频率,高风险区域检测频率相对而言要高些,如引种/车辆/精i液,建议每次采样检测,采购饲料/物资产品,建议先试用并隔离做检测,其余定期监测,检测频率可按每月或每周进行,具体可根据本场实际情况而定,可按照场内所划分的管理单元格进行全i方位的筛选,从而降低疾病传入风险。如果其他尚未被评估的原料符合以下标准就更有利于病毒存活:蛋白质含量高(特别是**蛋白质)、猪源、相对表面积较大质量(比)、含有载体的微成分。



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